陳佩伶1965年入永隆影業公司,參加拍攝臺語片。1966年入國聯影業公司。1970年因在影片《苦情花》中扮演角色,獲第十六屆亞洲影展最佳女配角獎。1970年入中國電視公司,參加拍攝閩南語電視連續劇,期間也參加拍攝影片。陳佩伶很小就出道,以演出臺語片為主,以電影「苦情花」獲得第十屆亞洲影展最佳女配角獎。17歲與導演陳俊良結婚,離婚後獨力扶養二女,後來中視開播,她演出閩南語連續劇「啞巴與新娘」,「一代女皇武則天」,「她的一生」等。劇照陳佩伶還是中視閩南語連續劇中的常青樹,其演技的精湛,內心戲的表達收放自如,正是「一代女皇」制作單位找她演劇中嚴肅善妒的王皇后的主因。《一代女皇》的重點雖是武則天──潘迎紫,但是為了戲劇效果,編劇強化了王皇后──陳佩伶的份量,讓兩人在宮中對立,達到沖突的效果。1988年7月31日晚間九時,陳佩伶包計程車去基隆作工地秀,車駛至南港至汐止間高速公路時,因故障靠至路肩檢修,卻被后方一輛欲超車的私家車追撞,計程車司機當場死亡,陳佩伶則被撞成重傷,送至基隆長庚醫院急救,第二天死亡,享年三十八歲。在意外身亡後家人還捐了兩百萬給演藝工會,用來慰問資深藝人。她是很難得的雙聲帶演員。
劇照梘硌苦情花百丑大全獨行大鏢客騙術大王歡天喜地吉屋招租劍盲俠血滴子劇照欲火焚身活著為了你進攻美人關龍虎過江夜女郎克星英雄本色劇照13個半房客糊涂大將軍熊心豹膽糊涂大偵探天后大太監金色太陽包公斬駙馬快刀亂麻斬無敵飛金剛陳佩伶寒樓俠客斷魂橋太極氣功大英雄禁宮奇女1985年：《一代女皇》飾演：王皇后